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方法指南:细胞增殖和细胞活性检测方法指南(点击查看/下载)PDF
说明书:CFSE Cell Proliferation Kit说明书(点击下载)
通过荧光染料标记法可以追踪细胞分裂的情况,进而检测和定量分析细胞增殖的情况(图1)。Applied BioProbes 最新开发的Cell-ID™ Cell Proliferation Kits是用于检测细胞增殖和细胞示踪的试剂盒。该试剂盒的探针可以穿透细胞膜并与细胞内的蛋白质共价结合,而不会影响细胞的形态学、生理学上的改变。这些示踪染料的荧光信号都很强,当细胞分裂时,母细胞内的染料会被平均分配到子细胞中,细胞的荧光信号就会减弱一半。通过这种荧光信号强弱的变化,可以利用流式细胞仪检测到细胞分裂6-10代的子代细胞(图2)。我们提供的Cell-ID™ CFSE Cell Proliferation Kit 采用488 nm 激发光源,Cell-ID™ Violet Cell Proliferation Kit 采用405 nm 激发光源。
图1. 细胞分裂时细胞分布和荧光强度变化演示图。 (A) 通过荧光强度变化分析细胞增殖情况; (B) 流式细胞术分析细胞分裂情况,随着细胞代数增加、细胞荧光强度不断减弱。
图2. 流式细胞仪分析细胞分裂结果图。使用1uM的CFSE或Violet荧光染料孵育Jurkat细胞(~1×106 cells/ml) ,细胞培养7天之后用FACS流式细胞仪分析荧光强度。左侧是用Cell-ID™ CFSE Cell Proliferation Kit测试结果;右侧是用Cell-ID™ Violet Cell Proliferation Kit测试结果。