ECL化学发光底物(超敏)
产品简介:
ECL超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。
用途:用于HRP标记抗体的Western Blot和HRP标记探针的核酸杂交。
产品特点:
1、灵敏度高:可检测低皮克级的蛋白;
2、信号持续时间长:光信号持续时间长达5小时;
3、稳定试剂:工作液在24小时内保持稳定;
4、成像方法:适用于X射线胶片、CCD或激光凝胶成像仪;
5、价格经济:针对稀释的抗体浓度条件进行了优化,节省抗体:
一抗:以1 µg/mL储存液稀释1:1,000至1:4,000倍
二抗:以1 µg/mL储存液稀释1:2,000至1:5,000倍
6、简单易用:可替代其它公司的ECL发光底物,操作步骤无需进行特别优化;
注意事项:
(1)步骤1~5可在日光灯下操作;但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免之。
(2)长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。
(3)发光工作液孵育约3分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见,低丰度蛋白条带发光较弱甚至肉眼不可见但可使X光胶片曝光。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使X光胶片感光,因而弱带可曝光1-10小时。如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL发光和曝光。
(4)由于超敏发光液极其灵敏,建议按照推荐比例稀释抗体。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带,导致失败。
(5)某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。
(6)使用肉眼可见的预染色蛋白Marker和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。
(7)叠氮钠是 HRP 的抑制物,不要使用叠氮钠作为缓冲液的防腐剂。
保存条件:
室温运输,4 ℃密封避光保存一年,短期可放置室温。