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本品100U=100 Weiss Unit = 20000 CEU (也就是其他品牌的20000U的T4连接酶)
1 Weiss Unit = 200 CEU
1 Weiss Unit = 200 CEU
* One CEU is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of lambda DNA in 30 min at 16°C.
制品说明:T4 DNA Ligase 是从表达T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化而来的。它催化相邻DNA链的的5’-磷酸末端和3’羟基末端以磷酸二酯键结合反应。该酶催化平滑末端或粘性末端DNA的连接,修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交中的单链中的单链切口。
适用范围:(1)DNA片段和载体DNA快速连接;
(2)限制酶切片段的克隆;
(3)将DNA片段与Linker或Adaptor连接。
建议连接反应体系: (以 10 μl 反应体系为例,插入片段:载体 =3:1摩尔比)
反应循环的设置:
粘端连接:22oC反应10分钟(可根据需要延长到1小时);也可以16oC反应1-5小时。
平端连接:22oC反应2小时或16 oC过夜。