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修饰酶
商家描述
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Template Eliminator 是在 Dpnl 与 SgeI 基础上开发得到的具有更好的质粒消化效果的一款酶。该酶通过按一定比例将 Dpnl 与 Sgel 混合得到。由于 DpnI 切割 Dam+ 的底物,SgeI 切割 Dcm+ 的底物,二者混合以后可以相互弥补,从而提高对质粒的消化效率。DpnI 需要在识别序列中存在 N6- 甲基腺嘌呤,才能切割 DNA。从Dam+ 菌株纯化的 DNA 将是 DpnI 的底物。DpnI 只能切割完全腺甲基化 Dam 位点。半腺甲基化 Dam 位点的 DpnI 切割速度慢 60 倍。SgeI 可切割在单链或双链 DNA 上含有 5- 甲基胞嘧啶的 DNA 靶标。通过 Dcm 或 CpG 甲基转移酶甲基化的 DNA 将成为 SgeI 的底物。为实现有效切割,至少需要复制两个 SgeI 识别序列。甲基化 DNA 完全酶切所需的酶量取决于 SgeI 识别位点的数量。因此,将 DpnI 与SgeI 通过一定比例混合,可以覆盖更多的使用场景,兼顾更多的宿主类型,提高点突变的灵活性。经验证,本产品对于不同类型的模板,质粒残留率仅为 DpnI 的10~20%,仅为 SgeI 的 0.1~1%。同时该酶可以适应常规 PCR 反应Buffer,从而可以在扩增完成后直接进行消化。