BBcellProbe® FDA/PI双染细胞毒性检测试剂盒是利用细胞荧光染料FDA和PI对细胞进行染色，利用FDA标记靶细胞，PI标记死的靶细胞来区分不同的细胞，活的靶细胞成绿色，死的靶细胞成红色（和绿色），从而检测细胞毒性作用。 根据不同的实验方案设计，可以用来检测细胞活性/化合物的细胞毒性作用。也可以用来检测杀伤性T细胞或NK细胞介导的细胞毒作用。 FDA是一种可对活细胞进行荧光标记的染料，可以标记活体细胞。FDA是一种非荧光疏水性荧光素衍生物，它可以通过细胞膜。FDA在结构上将酚羟基部位改造成AM体，所以自身不发荧光，荧光背景低，脂溶性高，能够轻易穿透细胞膜，进入细胞内的FDA的AM部位能被细胞内酯酶水解高荧光产物荧光素的二乙酸酯基团。通过共价结合赖氨酸侧链的氨基而掺入细胞内的蛋白，且结合后发出强的绿色荧光。荧光素分子在具有完整膜的细胞中积累，因此绿色荧光可用作细胞活力的标记。不具有活性代谢的细胞可能不会积聚荧光产物，因此不会显示出绿色荧光。 FDA毒性小，不影响细胞的增殖能力。此方法操作简单，且不用放射性同位素，不存在安全隐患。可以更快速，更准确和更安全地得到想要的实验数据。 FDA/PI标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞毒性检测。 FDA标记细胞呈绿色荧光，荧光波长：λex=496 nm, λem=516 nm。流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为516nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。PI标记细胞呈红色荧光，流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为647nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL2 detection channel。 FDA标记的细胞除了流式细胞仪检测细胞毒性外，还可单染后用于细胞增殖检测，或者用荧光酶标板定量活细胞数目，或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。 FDA的荧光产物的细胞内保留特性较差，一般2小时保留率低于20%，需要保留特性较好的细胞质染料的可以选择贝博其它货号的产品，例如Calcein AM染料